【贵阳生物实验室】:HPLC常见峰形及异常情况
发布时间:12月30日 浏览:3445   [ ] 视力保护色:
一、HPLC
全称高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography),是一种快速的分离分析技术。HPLC具有高效、高速、高灵敏度、适用范围广和流动相选择范围广等特点,因而发展迅速,并在医药、食品、化妆品和农药等很多行业有着广泛的应用。
二、HPLC峰形

HPLC分析过程中,由于各种原因,经常会出现一些异常峰形,严重影响对结果的分析,给实验人员带来很大的困扰。下面介绍一些常见的峰形以及可能的原因:

贵阳生物实验中心

1. 未出峰
可能的原因:
a.       未成功进样,或样品未溶解进溶剂中,或样品分解变质或样品浓度太低;
b.      仪器本身的问题:泵或者检测器故障;
c.       流动相选择不合适,如对于反相硅胶柱来说,若流动相极性太大,是冲不下来一些小极性的物质的,物质一直保留在柱子中,因而不出峰。
d.      检测器不合适,如:有些产品没有紫外吸收或者吸收很弱,但是检测还使用了UV检测器
2.平头峰

可能的原因:
a.  样品浓度过大或进样体积太大,这个也是大多数原因
b. 检测器设置不正确

可能的原因:
a.       流动相吸收本底值过高
b.      进样过程中进入空气
c.       样品组分的吸收低于流动相
d.      配制样品的溶剂与流动相不一致
4.肩峰
可能的原因:
a.       进样量过大;样品浓度过高
b.      保护柱或色谱柱柱头堵塞
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