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聚合酶连式反应
聚合酶链式反应(polymerase chain reation PCR) 又称为无细胞克隆系统或特异性DNA 序列体外引物定向酶促扩增法，是基因扩增技术的一次重大革新。PCR 是利用单链募核苷酸引物对特异DNA 片段进行体外快速扩增的一种方法。该反应是一个指数式反应，可在短时间内使极微量的目的DNA 片段特异地扩增上百万倍。
RCR操作体系中含有:
(1)模板:其中包含有目的基因片段，PCR反应的模板是待检测核酸(DNA或RNA)分子，双链DNA可直接用于反 应，而RNA则需要用反转录酶反转录成为cDNA,然后用作聚合酶反应的模板。
(2)DNA聚合酶:最初的聚合酶链反应是用DNA聚合酶I的Klenow片段或T4DNA聚合酶催化的。但是由于每轮反应都需要三个温度点，最初的PCR需要在每轮反应中加人DNA聚合酶。以后应用耐热TaqDNA聚合酶后，一次加酶反应到底的问题才得以完满的解决。
(3)一对引物:这是两个人们根据已知DNA序列的、由人工合成的、与所要扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段，即左右端引|物。
(4)四种三磷酸脱氧核苷(即dNTP):这是合成DNA所需要的原料。
(5)适当的缓冲液体系。
(1)模板:其中包含有目的基因片段，PCR反应的模板是待检测核酸(DNA或RNA)分子，双链DNA可直接用于反 应，而RNA则需要用反转录酶反转录成为cDNA,然后用作聚合酶反应的模板。
(2)DNA聚合酶:最初的聚合酶链反应是用DNA聚合酶I的Klenow片段或T4DNA聚合酶催化的。但是由于每轮反应都需要三个温度点，最初的PCR需要在每轮反应中加人DNA聚合酶。以后应用耐热TaqDNA聚合酶后，一次加酶反应到底的问题才得以完满的解决。
(3)一对引物:这是两个人们根据已知DNA序列的、由人工合成的、与所要扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段，即左右端引|物。
(4)四种三磷酸脱氧核苷(即dNTP):这是合成DNA所需要的原料。
(5)适当的缓冲液体系。
